Jornal de Biomarcadores Moleculares e Diagnóstico

A targeted nanoconjugate is being developed for non-invasive detection of gene expression in cells expressing the JC virus oncoprotein, T-antigen, which has been associated with medulloblastoma and other cancers. JC virus T-antigen localizes predominantly to the nucleus via a classical monopartite nuclear localization signal (NLS). An antibody fragment which recognizes JC virus T-antigen was attached to cross-linked dextran coated iron oxide nanoparticles. Radiolabeled conjugates were added to mouse medulloblastoma cells expressing the target T-antigen to test their ability to bind to tumor cells and be internalized by the cells. All conjugates containing targeting antibody bound to cells and were internalized, with increasing levels over time. There was no difference in cell binding or internalization among conjugates containing 2, 4, 6 or 8 antibody fragments per nanoparticle. Conjugates with only nonspecific antibody on nanoparticles, or unconjugated nonspecific antibody, had significantly lower total binding and internalization than conjugates with targeting antibody. Unconjugated targeting antibody had equivalent or lower cell uptake compared with targeted nanoparticle conjugates. Specificity of uptake was demonstrated by >80% reduction of nanoconjugate uptake in the presence of 100 fold excess of unconjugated antibody. The presence of a membrane translocation peptide (Tat) on the nanoparticles in addition to targeting antibody did not improve nanoconjugate internalization over the internalization caused by the antibody alone. This antibody nanoconjugate demonstrates feasibility of targeting a nuclear protein and suggests that a minimum number of antibody fragments per nanoparticle are sufficient for achieving binding specificity and efficient uptake into living cells.

Este artigo apresenta o resultado de experimentos extensivos em amostras de soro sanguíneo de 20 pacientes com leishmaniose e 44 indivíduos saudáveis ??usando espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) e o software Chenomx. As concentrações de selênio em todas as 64 amostras de soro também foram medidas usando um dispositivo de absorção atômica. Os grupos saudáveis ??e pacientes foram completamente diferenciados usando o método dos mínimos quadrados parciais (PLS). Além disso, variáveis ??importantes que poderiam influenciar fortemente o grupo de pacientes foram detectadas pelo gráfico de carga PLS. Este artigo também apresenta os resultados correspondentes à modelagem linear e não linear da concentração de selênio no soro. A regressão linear múltipla (MLR) passo a passo foi usada para selecionar os cinco descritores mais importantes. Na abordagem de modelagem de regressão linear múltipla, os resultados obtidos para os conjuntos de treinamento, teste e validação R2 foram 0,98, 0,97 e 0,94, respectivamente. Empregando os mesmos descritores na abordagem de modelagem MLR, uma rede neural artificial não linear (ANN) com uma estrutura 5-3-1 foi construída; os resultados obtidos deste modelo não mostraram nenhuma melhora significativa em comparação com aqueles de MLR. Houve boa concordância entre os valores experimentais de concentração de selênio e os valores dos dois modelos.