Journal of Blood & Lymph

Avaliação da metilação do DNA e da expressão dos genes JAK2 e STAT3 na leucemia linfoblástica aguda

Abstract

Majid Naderi, Maryam Emami*, Mohammad Shojaei, Tahmine Davoodi e Dor Mohammad Kordi Tamandani

Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) é a malignidade mais prevalente entre crianças. A modalidade terapêutica primária envolve a administração de quimioterapia de indução sozinha ou em combinação com diversas estratégias curativas. As evidências existentes sugerem que mecanismos epigenéticos podem servir como mediadores da influência de variações genéticas herdadas em características fenotípicas. Consequentemente, nossa investigação teve como objetivo verificar o papel potencial da metilação do DNA na mediação do impacto de loci de risco genético na LLA infantil. Em mamíferos, a via JAK/STAT representa o principal mecanismo de sinalização para uma ampla gama de citocinas e fatores de crescimento. A ativação de JAK induz proliferação celular, migração, diferenciação e apoptose. Uma infinidade de intervenções terapêuticas foram concebidas para modular essa via de sinalização, exibindo vários graus de eficácia e deficiências. Pioneiramente, este estudo lança luz sobre o status de metilação de JAK2 e STAT3, bem como os perfis de expressão de mRNA, em pacientes com LLA antes e após a administração do medicamento. Examinamos para determinar se houve alguma alteração na metilação e na expressão gênica entre os dois genes durante o tratamento quimioterápico.

Este estudo, que ocorreu de 2015 a 2017, utilizou um delineamento de caso-controle. Ele incluiu 50 amostras de sangue de indivíduos recentemente diagnosticados com Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) que ainda não haviam recebido nenhum medicamento quimioterápico. Após um período de dois meses de recebimento do medicamento, essas amostras foram testadas novamente. A população do estudo consistiu em 23 homens e 27 mulheres com idade média de 7,52 ± 4,13. Além disso, 50 amostras de sangue de voluntários saudáveis ??sem quaisquer condições médicas significativas foram incluídas no estudo. Este grupo de controle também consistiu em 23 homens e 27 mulheres, com idade média de 12,36 ± 5,63. Todas as amostras foram armazenadas a uma temperatura de -80 °C até que a análise molecular pudesse ser conduzida. A frequência de metilação do gene JAK2 foi encontrada como sendo 35 (70%) na amostra de sangue retirada do paciente recém-diagnosticado (chamada de amostra1), 18 (36%) na amostra de sangue retirada após o paciente receber quimioterapia (chamada de amostra 2) e 3 (6%) nas amostras de sangue dos controles saudáveis. O gene STAT3 exibiu uma taxa de metilação de 54% (N=27) na amostra1, 32% (N=16) na amostra 2 e 4% (N=2) no grupo controle. Uma comparação entre amostras metiladas e não metiladas indicou uma disparidade significativa entre os casos e controles em termos de JAK2 (OR1=36,55; IC 95%: 9,81 a 136,10, P < 0,0001) e STAT3 (OR1=28,17; IC 95%: 6,16 a 128,80, P < 0,0001). Além disso, uma distinção notável foi observada entre pacientes submetidos à quimioterapia e os indivíduos saudáveis ??em relação a JAK2 (OR2=8,81; IC 95%: 2,39 a 32,40, P = 0,0011) e STAT3 (OR2=11,29; IC 95%: 2,43 a 52,38, P = 0,0020). Em termos alternativos, quando avaliamos o estado de metilação em pacientes subsequentes à administração de um medicamento quimioterápico em relação à sua condição pré-tratamento, um achado estatisticamente significativo foi observado em JAK2 (OR3=4,14; IC 95%: 1,79 a 9,57, P=0,0009). No entanto, nenhuma disparidade foi identificada em STAT3 (OR3=2,49; IC 95%: 1,10 a 5). Dentro da estrutura desta investigação, examinamos a disparidade entre a metilação do DNA promotor e a expressão de genes dentro desta via entre pacientes que receberam o medicamento no dia inicial, bem como as disparidades com o grupo controle. Os medicamentos quimioterápicos impediram o ciclo celular e atenuaram os efeitos adversos, particularmente no contexto de metástase da medula óssea, que dependia da recidiva do paciente nos anos subsequentes.